微环境可以通过 mCRC 中转移相关的成纤维细胞（MAF）激活进行调节，以及是否可以改变这种 MAF 激活以提高抗血管生成治疗的疗效。
1、CRC中的 MAF 高度激活
?在LM中观察到 aSMA、p-MLC2 和 COL-I 的显着更高表达，表明 MAF 的肌成纤维细胞和 ECM 重塑特征。
?接下来，从 CRC 患者的 pTU(CAF)和 LM(MAF)中分离出原代成纤维细胞。MAF 显示出 aSMA 和 p-MLC2 的显着上调，证实了肌成纤维细胞和细胞收缩性信号的增加。FAs 的量化显示 MAFs 中 FAs 的平均面积更大（图L和M），支持 CRC MAFs 被高度激活。
2、晚期 CRC 患者的 ECM 重构和硬化特征
?为了鉴定与肝转移相关的基因表达特征，我们对 CRC 患者的 pTU 和 LM 进行了 RNA 测序（RNA-seq）。使用通路相互作用数据库(PID)对 LM中上调基因进行的基因集分析(GSA)揭示了整合素信号传导的显着富集。为了进一步表征成纤维细胞的基因表达，我们在成功富集后对分离的原代 CAF 和 MAF进行了 RNA-seq。
?我们鉴定了3，721个差异表达的基因。GO确定了MAF中上调的肌成纤维细胞/ECM重塑特征。KEGG确定了ECM-受体相互作用和FA特征和PID确定了整合素信号（图H）。此外，基因集富集分析(GSEA)还揭示了差异表达基因的肌动蛋白介导的细胞收缩、FA、ECM成分、肌生成和血管生成特征的强烈富集（图I-M）。
3、MAFs增加微环境硬度，支持血管生成
?我们进行了凝胶重塑分析，并观察到MAF显示出更密集、更复杂的F-肌动蛋白网络（图 A），并且可以比 CAF 更大程度地收缩凝胶（图B）。在新鲜和冷冻保存的组织中，我们观察到 LM 的基质硬度显着增加（图C-D）。基质硬度与来自同一患者的样本中的COL-I、aSMA 和 p-MLC2 表达相关（图E-G）。
?基质硬化调节 EC 增殖、血管生成、血管生长和分支，为了研究这种联系，我们评估了 LM 中的脉管系统，并观察了基质硬度和 CD31 血管面积之间的相关性（图H）。当在凝胶内培养时，允许成纤维细胞重塑基质，MAFs 诱导 EC 发
1、CRC中的 MAF 高度激活
?在LM中观察到 aSMA、p-MLC2 和 COL-I 的显着更高表达，表明 MAF 的肌成纤维细胞和 ECM 重塑特征。
?接下来，从 CRC 患者的 pTU(CAF)和 LM(MAF)中分离出原代成纤维细胞。MAF 显示出 aSMA 和 p-MLC2 的显着上调，证实了肌成纤维细胞和细胞收缩性信号的增加。FAs 的量化显示 MAFs 中 FAs 的平均面积更大（图L和M），支持 CRC MAFs 被高度激活。
2、晚期 CRC 患者的 ECM 重构和硬化特征
?为了鉴定与肝转移相关的基因表达特征，我们对 CRC 患者的 pTU 和 LM 进行了 RNA 测序（RNA-seq）。使用通路相互作用数据库(PID)对 LM中上调基因进行的基因集分析(GSA)揭示了整合素信号传导的显着富集。为了进一步表征成纤维细胞的基因表达，我们在成功富集后对分离的原代 CAF 和 MAF进行了 RNA-seq。
?我们鉴定了3，721个差异表达的基因。GO确定了MAF中上调的肌成纤维细胞/ECM重塑特征。KEGG确定了ECM-受体相互作用和FA特征和PID确定了整合素信号（图H）。此外，基因集富集分析(GSEA)还揭示了差异表达基因的肌动蛋白介导的细胞收缩、FA、ECM成分、肌生成和血管生成特征的强烈富集（图I-M）。
3、MAFs增加微环境硬度，支持血管生成
?我们进行了凝胶重塑分析，并观察到MAF显示出更密集、更复杂的F-肌动蛋白网络（图 A），并且可以比 CAF 更大程度地收缩凝胶（图B）。在新鲜和冷冻保存的组织中，我们观察到 LM 的基质硬度显着增加（图C-D）。基质硬度与来自同一患者的样本中的COL-I、aSMA 和 p-MLC2 表达相关（图E-G）。
?基质硬化调节 EC 增殖、血管生成、血管生长和分支，为了研究这种联系，我们评估了 LM 中的脉管系统，并观察了基质硬度和 CD31 血管面积之间的相关性（图H）。当在凝胶内培养时，允许成纤维细胞重塑基质，MAFs 诱导 EC 发
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